Subprojeto 11 – A integrina α2β1 na progressão tumoral mamária: papel no microambiente tumoral e na metástase

Participantes:  Heloisa Sobreiro Selistre de Araujo e Milene Nóbrega de Oliveira Moritz
UFSCAR

A habilidade das células aderirem umas as outras e à matriz extracelular é de essencial importância para a distribuição celular no organismo e a formação dos tecidos e órgãos. Entre as diferentes classes de moléculas de adesão, as integrinas destacam-se por atuarem como moléculas sinalizadoras de sinais mecânicos. Além dessas moléculas de adesão estarem envolvidas em funções celulares normais, também participam de processos patológicos como a migração de células de defesa do sangue para os tecidos em respostas inflamatórias e aliberação de células metastáticas do tumor primário e fixação aos órgãos secundários. Um dos tumores mais comuns em mulheres é o de mama que se caracteriza pela frequente metástase esquelética. Uma possibilidade que poderia explicar a seletividade ao osso é que as células tumorais expressam moléculas de superfície que facilitam a sua adesão às proteínas presentes na matriz extracelular do osso, principalmente ao colágeno. Estudos recentestem demonstrado uma relação entre a integrina α2β1, um receptor de colágeno, e o desenvolvimento de metástases. Neste contexto, compreender os mecanismos pelos quais essa integrina promove o tumor pode proporcionar um importante alvo para intervençõesfarmacológicas para a prevenção de metástases. Estudos anteriores mostraram que a desintegrina alternagina-C (ALT-C) inibiu a adesão celular ao colágeno tipo I em várias linhagens celulares tumorais e não tumorais pela interação com a integrina α2β1. Essa desintegrina também modulou a expressão de genes relacionados à angiogênese, desintegração da matriz extracelular e metástase,sendo, entretanto, necessários mais estudos para a melhor elucidação do seu mecanismo molecular de ação. Dessa forma, propõe-seinvestigar o papel da integrina α2β1como alvo na inibição da progressão tumoral mamária utilizando-se o silenciamento da subunidade α2 e a ALT-C, um inibidor competitivo da integrina α2β1, A hipótese principal deste estudo é que a integrina α2β1 seja relevante para o desenvolvimento de metástasesósseas e que a sua interação com a matriz extracelular do ossoauxilia na promoçãoda metástase. Para investigar esta hipótese serão realizados ensaios de adesão (estática e sob fluxo) ao colágeno I e à matriz produzida por osteoblastos e migração celular de células tumorais e não tumorais de mama (MDA-MB-231 e MCF10), silenciadas ou inibidas, simulando a interação entre a integrina α2β1 e ocolágeno.Será avaliada a expressão gênicapor array focado na plataforma PCR em tempo real, a expressão proteica porwestern blotting e a atividade enzimática por zimografia. Ensaios de superposição de marcação entre a integrina e a ALT-C serão avaliados por microscopia confocal.