Subprojeto 10. 4 – Estudos e manipulação de células únicas

Participantes: Carlos Lenz Cesar; Hernandes F. Carvalho; Mariana Ozello Baratti; Vitor Bianchin Pelegati
UNICAMP

Um dos objetivos desse sub-projeto é a caracterização óptica e espectroscópica que diferenciem células tronco de células normais, morte celular, apoptose, necrose e diferenciação celular. Para tanto utilizaremos fluorescência, tanto de marcadores exógenos, quanto a autofluorescência de NAD e FAD para caracterizar células em diferentes estágios com a intensidade da fluorescência, FLIM e FRET. Utilizaremos também espectroscopia/imagem como Raman e CARS para caracterizar e quantificar diferentes estados celular. Marcadores fluorescentes e espectroscopia Raman e CARS serão utilizadas na quantificação dos processos celulares de metilação, fosforilação, e outros. Esse projeto vem acompanhado de estudos de desenvolvimento embrionário através no modo de observação time-lapse utilizando as técnicas disponíveis no laboratório. No embrião temos certeza da existência de células tronco pluripotentes e que processos de diferenciação celular acontecerão. Utilizaremos embriões de peixe zebra de de Parhyaleshawaianses. O segundo objetivo é a utilização dos sistemas de manipulação através de pinças ópticas, laser cutting e AFM para a realização de manipulações celulares como transfecção, fotoporação, etc. Os resultados da manipulação serão acompanhados com as técnicas da plataforma fotônica no modo time-lapse.